Kit Transgénèse de la levure : Expression d'une protéine de la fluorescence GFP

Ce kit propose un nouveau protocole très simplifié, permettant de réaliser un transfert de gène interespèces. Par transgénèse, le gène codant la protéine fluorescente issue des tissus bioluminescents de la méduse va être exprimé par la levure S. cerevisiae.

Un protocole de transformation ultra simple adapté pour le milieu scolaire ! Jeulin a conçu un protocole qui ne nécessite pas de rendre les cellules compétentes. Il suffit de remettre en suspension des cellules de levures fraîches à partir d'une colonie, de mélanger avec la solution de transformation, l'ADN plasmidique, d'agiter (vortex) puis de laisser incuber 30 min à 42°C. Les levures sont ensuite mises en culture pour vérifier l'efficacité du transfert, puis la révélation de l'expression du gène de la bioluminescence est réalisée en éclairant les boîtes aux rayonnements UV.

Format : 15 tests
Durée de l'expérience : 120 min + 1 séance de lecture des résultats
Durée de conservation : 1 mois
Condition de stockage : + 4°C (Microtube ADN à -20°C si conservation longue) 

Le kit se compose de :
- Souche de levures sur boîte (x1)
- Solution de transformation (1,9 ml)
- 1 microtube d'ADN plasmidique (80 µl)
- 1 microtube d'ADN carrier (78 µl)
- 1 milieu prêt à couler YPD (200 ml)
- 1 milieu sélectif prêt à couler URA- (200 ml)
- 30 boîtes de Pétri de 55 mm
- 15 râteaux à ensemenceur
- 15 bâtonnets stériles
- 15 microtubes stériles pour la transformation
- 1 boite de Pétri 90 mm stérile (pour la mise en culture avant le TP)